淡水渔业

2020, v.50;No.345(01) 76-81

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青虾源维氏气单胞菌双重PCR检测方法的建立
Establishment of a duplex PCR assay for detection of Aeromonas veronii isolated from Macrobrachium nipponense

刘晓丹;肖自东;孙威;李席席;周一凡;张晓君;

摘要(Abstract):

根据NCBI已发表的维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)促旋酶B亚单位基因gyrB和编码细菌RNA聚合酶σ70因子基因rpoD的保守序列设计引物,建立了一种快速检测青虾源维氏气单胞菌的双重PCR检测方法。结果显示:青虾源维氏气单胞菌gyrB和rpoD基因PCR扩增产物大小分别为815 bp、554 bp,而对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)、哈维弧菌(Vibrio harveyi)、副溶血性弧菌(Vibrio parahemolyticus)、需钠弧菌(Vibrio natriegens)、非O1霍乱弧菌(non-O1 Vibrio cholerae)、阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)、产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)扩增结果皆为阴性;灵敏性试验结果显示该方法检测到的最低菌体DNA量为1.8×10~(-2) ng/μL,且10份送检样本检测结果与传统细菌分离鉴定结果相一致。结果表明,双重PCR检测方法特异性好、灵敏性高,适用于青虾源维氏气单胞菌的快速检测。

关键词(KeyWords): 青虾(Macrobrachium nipponense);维氏气单胞菌(Aeromonas veronii);gyrB;rpoD;双重PCR;检测技术

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 江苏省现代农业产业技术体系建设项目02(青虾产业技术体系);; 国家自然科学基金(31972830);; 扬州大学‘青蓝工程’项目

作者(Author): 刘晓丹;肖自东;孙威;李席席;周一凡;张晓君;

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